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    量子點熒光微球(羧基)偶聯(lián)使用說明書

    簡要描述:量子點微球(羧基)偶聯(lián)方法
    粒徑: 100nm-300nm
    激發(fā)/發(fā)射:365/610nm
    1. 保存條件:本產(chǎn)品需要于 2-8℃保存,切勿冷凍;
    2. 本產(chǎn)品在使用前確認處于均勻的懸浮狀態(tài),有輕微結(jié)塊可以用超聲去除;
    3. 本產(chǎn)品活化后建議立即進行偶聯(lián)實驗,活化狀態(tài)不宜長時間保存;
    4. 本產(chǎn)品僅供科研使用。

    • 產(chǎn)品型號:
    • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
    • 更新時間:2022-05-24
    • 訪  問  量:1568
    詳情介紹

    量子點微球(羧基)偶聯(lián)方法

    粒徑: 100nm-300nm

    激發(fā)/發(fā)射:365/610nm

    .  微球的清洗

    一般取 1mg 微球(10mg/ml) 標記 0.1mg 抗體,不同項目可進行兩邊濃度摸索優(yōu)化。

    具體操作流程如下:

    1.100ul 微球 + 900 ul 標記緩沖液50mM MES,pH 6.0或者0.05MPBS,pH 6.0

    2.17000rpm,離心 20min,第一遍;

    3.去掉上清,用 1000ul 標記緩沖液重懸微球;

    4.17000rpm,離心 20min,第二遍;

    5.去掉上清,用 1000ul 標記緩沖液重懸微球離心后微球重懸可使用水浴超聲儀,建議功率 500-700W,超聲時長 2-5min,下同,備用。

    .  微球的活化

    各稱取 20mg NHS  EDC,用標記緩沖液溶解,現(xiàn)用現(xiàn)配,即 20mg/ml NHS  EDC; 20ul NHS,加入到清洗后的微球中,快速混勻;

    然后再取 5ul EDC 加入到微球中,快速混勻; 室溫孵育,20-30min。

    .  清洗去除殘留 EDC將活化后的微球:

    1.17000rpm,離心 20min,第一遍;

    2.去掉上清,用 1000ul 標記緩沖液重懸微球;

    3.17000rpm,離心 20min,第二遍;

    4.去掉上清,用 1000ul 標記緩沖液重懸微球,備用。

    IV.  微球與抗體的偶聯(lián)

    0.1mg 抗體溶解于50mM MES,pH 8.5或者0.05MPBS,pH 8.5 2ml 離心管中,加入活化后的微球,快速混勻后,室溫孵育,3 小時。

    .  封閉

    配制 20mg/ml  BSA,即稱取 20mg BSA,用終濃度 100mM 乙醇胺溶液充分溶解,備用。

    微球標記抗體后,加入 100ul 上述封閉液 BSA,室溫孵育 1 小時。 .  去除未結(jié)合的抗體

    此步驟目的是通過高速離心的方法去除游離的未結(jié)合微球的抗體;

    具體流程如下:

    1.17000rpm,離心 20min,第一遍;

    2.去掉上清,用 1000ul 稀釋液50mM PBS,pH 7.4  50mM Tris,pH 8.0)重懸微球;

    3.17000rpm,離心 20min,第二遍;

    4.去掉上清,用 1000ul 稀釋液重懸微球,即為抗體-微球標記復(fù)合物,4℃放置備用, 如長期保存需加入終濃度為 0.2% BSA 和 0.02% NaN3 溶液。

     

    注意事項

    1. 保存條件:本產(chǎn)品需要于 2-8℃保存,切勿冷凍;

    2. 本產(chǎn)品在使用前確認處于均勻的懸浮狀態(tài),有輕微結(jié)塊可以用超聲去除;

    3. 本產(chǎn)品活化后建議立即進行偶聯(lián)實驗,活化狀態(tài)不宜長時間保存;

    4. 本產(chǎn)品僅供科研使用。


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