抗體粗純化試劑盒

• 原理

本試劑盒采用鹽析法，該純化方法是基于在待純化血清中加入鹽溶液，由于抗體也是一種蛋白質，其在水溶液中的溶解度是由其本身攜帶的親水基團數和電荷數決定的，當向抗血清中加入飽和鹽溶液后，鹽離子與抗體競爭溶液中的水分子，因為鹽離子與抗體分子相比，具有更強的親水性，因此抗體分子表面的水化膜被破壞，同時其暴露出來的帶電基團被溶液中的鹽離子所中和進而導致其溶解度大大降低，依據此原理從而將其從抗血清中分離。

• 產品特點

1. 試劑盒內含有分析所需的所有必需試劑，操作簡單便捷；
2. 試劑盒內組分經實驗優化，確保更高的檢測靈敏度；
3. 保存條件：2-8℃。
4. 規格：待純化抗體1-5ml

三、所需材料

儀器：離心機、離心管（5mL、15 mL、50mL）

試劑：去離子水

四、 試劑盒組成

• 純化步驟

1. 樣品準備：將抗血清與A液預冷后按體積比1:2混合。
2. 鹽析：將B液預冷，向上述混合溶液中加入等體積B液，邊滴加邊搖勻（在冰浴上進行），然后迅速轉入離心機內離心，8000r/min離心5min。
3. 洗滌：去上清，將沉淀用去離子水清洗1遍（注意：切勿用水流沖洗沉淀）。
4. 復溶：迅速將洗滌后的沉淀用等體積C液溶解，得粗純抗體。

• 注意事項

1. B液在冷藏條件下有晶體析出屬正常現象。
2. A液和B液需要提前預冷，且粗純過程在冰浴上進行。
3. 洗滌沉淀時水流沿沉淀反方向進入，沿沉淀方向流出。
4. 沉淀應及時復溶。
5. 將所純化的抗體加入10%-20%的甘油置于-20攝氏度或者-80攝氏度即可長期保存。