赭曲霉毒素（OTA）免疫層析親和柱

一、產品用途：

赭曲霉毒素（OTA）免疫層析親和柱可選擇性吸附樣品提取液中的赭曲霉毒素，從而對樣品液中的赭曲霉毒素起到非常針對性的純化作用，過柱純化后的樣品液純度被提高，可用于不同分析方法的測定。

二、產品概述：

赭曲霉毒素是一類真菌（如赭曲霉和純綠青霉）的有毒性的代謝產物，這類產毒素的真菌廣泛生棲在糧食及某些青干飼草中，產生毒素。動物食用被其污染的原料生產的飼料，可引起中毒。OTA對食品污染的范圍較廣，包括谷物、豆類、葡萄干、啤酒和葡萄汁等。

三、反應原理：

赭曲霉毒素（OTA）免疫層析親和柱測定的原理是抗原抗體反應。赭曲霉毒素單克隆抗體固定于柱內凝膠上，樣品中的赭曲霉毒素經過提取、過濾、稀釋，然后緩慢通過赭曲霉毒素免疫親和柱，在柱內赭曲霉毒素與抗體特異性結合，之后洗滌免疫親和柱，除去未結合的其他物質。用乙酸甲醇洗脫赭曲霉毒素，注入到分析儀器中進行檢測。

四、產品包裝組成：

每盒中包含25支赭曲霉毒素免疫親和柱及1套相應說明書。

五、IAC性能：

1. 性能參數

2、交叉反應率

六、注意事項：

1、赭曲霉毒素對人體有害，應戴手套操作。

2、使用過的玻璃容器及赭曲霉毒素溶液用5%濃度的次氯酸鈉溶液浸泡過夜。

3、不要使用過了有效日期的免疫親和柱。

4、免疫親和柱不使用時要2-8℃保存，不可凍存。

5、使用前，免疫親和柱需回至室溫（22-25℃）。

6、取樣量：根據實際情況可以適當增減，但不可太少，同時提取液體積要按比例隨之改變。

7、pH：上柱液pH要在6~8之間，若偏離此范圍需用鹽酸或氫氧化鈉調節pH。

七、需要的材料但盒中不提供：

八、試劑配制：

1、提取液：甲醇-水（8:2）

移取800mL甲醇，加一級水200mL混合。

2、磷酸鹽緩沖溶液（以下簡稱PBS）：稱取8.00g氯化鈉，1.20g磷酸氫二鈉，0.20g磷酸二氫鉀，0.20gkcl，用900mL蒸餾水溶解，然后用鹽酸調節pH值至7.4，后用蒸餾水稀釋定容至1000mL。

3、洗脫液：2%乙酸甲醇

移取2mL乙酸，加98mL甲醇混合。

九、樣品處理：真菌毒素分析的大誤差來源是樣品的收集和取樣過程，所以要保證樣品收集和取樣的代表性。

（一）一般固體樣品

1、稱取5g試樣（精確到0.01g）于50ml離心管中；

2、加20.0mL提取液，渦旋混勻，置于超聲波/渦旋振蕩器或搖床中振蕩20min（或高速均質3min）；

3、在5000r/min下離心10min（或均質后用玻璃纖維濾紙過濾至澄清）；

4、取濾液4ml，加入24ml PBS，混勻（如混濁，請用玻璃纖維濾紙過濾至澄清）

（二）植物油脂

1、稱取5g試樣（精確到0.01g）于50ml離心管中；

2、加20.0mL提取液，渦旋混勻，置于超聲波/渦旋振蕩器或搖床中振蕩20min（或高速均質3min）；

3、5000r/min離心10min，取上清液備用；

4、取濾液4ml，加入24ml PBS溶液，混勻，（如混濁，請用玻璃纖維濾紙過濾至澄清）

（三）醬油、食醋、咖啡、酒類

1、稱取5g試樣（精確到0.01g）于50ml離心管中；

2、用甲醇定容至25ml（精確至0.1mL），渦旋混勻，置于超聲波/渦旋振蕩器或搖床中振蕩20min（或高速均質3min）

3、在5000r/min下離心10min（或均質后用玻璃纖維濾紙過濾至澄清）；

4、取濾液4ml，加入，加入24ml PBS溶液，混勻，（如混濁，請用玻璃纖維濾紙過濾至澄清）

十、操作程序：符合國標GB 5009.96-2016

1、連接:將免疫親和柱后蓋取下，用剪刀剪開，重新蓋上，連接于泵流操作架的30mL注射器下；

    2、上樣:移取上述提取液移至注射器內，打開下端堵頭；

    3、富集:將空氣壓力泵與注射器連接，調節壓力使樣品提取液緩慢通過免疫親和柱，建議重力過柱；

    4、洗滌:用20mL蒸餾水分兩次加壓清洗，棄去全部流出液，并使2-3mL空氣通過柱體；

    5、洗脫:為保證洗脫充分，以2ml 2%乙酸甲醇進行洗脫，重力洗脫即可。首先，將免疫親和柱內液 體排干，加1.0mL乙酸甲醇于柱管內，重力過柱，當溶劑通過柱子后；再加入1.0mL乙酸甲醇重復上述洗脫步驟，后輕微加壓排凈洗脫液，合并洗脫液，將洗脫液濃縮吹干，用1mL流動相復溶，渦旋30s溶解殘余物，0.22μm濾膜過濾，待測。

十一、操作流程圖示

產品信息：

產品名稱：赭曲霉毒素免疫親和柱

產品貨號： LD-004

產品描述：赭曲霉毒素單克隆抗體

包裝單位：25支/盒

儲存條件：2～8℃，切勿冷凍

保質期：18個月

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