嘔吐毒素（DON）免疫層析親和柱

一、產(chǎn)品用途：

嘔吐毒素（DON）免疫層析親和柱可選擇性吸附樣品提取液中的嘔吐毒素，從而對樣品液中的嘔吐毒素起到非常針對性的純化作用，過柱純化后的樣品液純度被提高，可用于不同分析方法的測定。

二、產(chǎn)品概述：

嘔吐毒素主要污染小麥、大麥、玉米等谷類作物，也污染糧食制品，人和動物在誤食被該毒素污染的糧谷類后可以產(chǎn)生廣泛的毒性效應。它還常與其它的霉菌毒素如黃曲霉毒素共同污染農(nóng)作物，進入人體后可以相互影響，對人類及動物的健康構成威脅。DON屬于劇毒或中等毒物，在體內(nèi)可能有一定的蓄積，但無特殊的靶器官，具有很強的細胞毒性。

三、反應原理：

嘔吐毒素（DON）免疫層析親和柱測定的原理是抗原、抗體反應，抗體連接在柱體內(nèi)，樣品經(jīng)過提取、過濾后，緩慢的通過脫氧雪腐鐮刀菌烯醇免疫親和柱，在免疫親和柱內(nèi)毒素與抗體結合，之后洗滌免疫親和柱除去沒有被結合的其他無關物質。用甲醇洗脫脫氧雪腐鐮刀菌烯醇，經(jīng)氮氣吹干復溶后注入到分析儀器中用于檢測。

四、產(chǎn)品包裝組成：

每盒中包含25支黃曲霉毒素B₁免疫親和柱及1套相應說明書。

五、IAC性能：

1、性能參數(shù)

2、交叉反應率

六、注意事項：

1、嘔吐毒素可致癌，應戴手套口罩等防護工具操作。

2、使用過的玻璃容器及黃曲霉毒素溶液用5%濃度的次氯酸鈉溶液浸泡過夜。

3、不要使用過了有效日期的免疫親和柱。

4、免疫親和柱不使用時要2-8℃保存，不可凍存。

5、使用前，免疫親和柱需回至室溫（22-25℃）。

6、取樣量：根據(jù)實際情況可以適當增減，但不可太少，同時提取液體積要按比例隨之改變。

7、pH：上柱液pH要在6~8之間，若偏離此范圍需用鹽酸或氫氧化鈉調節(jié)pH。

七、需要的材料但盒中不提供：

八、試劑配制：

1、磷酸鹽緩沖溶液（以下簡稱PBS）：稱取8.00g氯化鈉，1.20g磷酸氫二鈉，0.20g磷酸二氫鉀，0.20gkcl，用900mL蒸餾水溶解，然后用鹽酸調節(jié)pH值至7.4，后用蒸餾水稀釋定容至1000mL。

2、乙腈-水（8+2）：取800mL 乙腈，加入200mL 去離子水。

九、樣品處理：真菌毒素分析的大誤差來源是樣品的收集和取樣過程，所以要保證樣品收集和取樣的代表性。

（一）玉米、小麥、面粉、配合飼料、濃縮料、精補料等吸水性較小的樣本（稀釋倍數(shù)：2倍）

1、5g±0.01g 樣品（固體樣品需粉碎，并過1mm 分樣篩），20mL 水；

2、高速均質1min，或用搖床200r/min～300r/min 劇烈振蕩20min；

3、5000r/min離心10min，取上清液備用；

4、取4mL 上樣液過免疫親和柱凈化。

（二）麩皮、豆皮、玉米胚芽粕、米糠等吸水性較強的樣本（稀釋倍數(shù)：2倍）

1、4g±0.01g 樣品（固體樣品需粉碎，并過1mm 分樣篩），40mL 水；

2、高速均質1min，或用搖床200r/min～300r/min 劇烈振蕩20min；

3、5000r/min離心10min，取上清液備用；

4、取10mL 上樣液過免疫親和柱凈化。

（三）醬油、食醋、醬及醬制品（稀釋倍數(shù)：2倍）

1、稱取樣品5g(準確到0.1g)，用水定容至20mL，混勻，置于超聲波/渦旋振蕩器或搖床中超聲或振蕩20min。

3、5000r/min離心10min，取上清液備用；

4、取4mL 上樣液過免疫親和柱凈化。

（四）酒類（稀釋倍數(shù)：2倍）

1、取酒樣5g(準確到0.1g)，加入1g 聚乙二醇，用水定容至20mL，混勻，置于超聲波/渦旋振蕩器或搖床中超聲或振蕩20min；

3、5000r/min離心10min，取上清液備用；

4、取4mL 上樣液過免疫親和柱凈化。

（五）嬰幼兒米粉（稀釋倍數(shù)：2倍）

1、5g±0.01g 樣品，加入20mL 乙腈-水（8+2）；

2、高速均質1min，或用搖床200r/min～300r/min劇烈振蕩20min；

3、5000r/min離心10min，取上清液備用；

4、取5mL 混勻后的液體，加入30mL PBS 緩沖液，混勻；

5、取24mL 上樣液過免疫親和柱凈化。

十、操作程序：符合國標GB 5009.111-2016

1、連接:將免疫親和柱后蓋取下，用剪刀剪開，重

新蓋上，連接于泵流操作架的30mL注射器下；

2、上樣:移取上述提取液移至注射器內(nèi)，打開下端堵頭；

3、富集:將空氣壓力泵與注射器連接，調節(jié)壓力使樣品提取液緩慢通過免疫親和柱，建議重力過柱；

4、洗滌:用20mL蒸餾水分兩次加壓清洗，棄去全部流出液，并使2-3mL空氣通過柱體；

5、洗脫: 待液體排干后，上樣1mL 甲醇，流速1 滴/秒，收集洗脫液，并在50～60℃加熱條件下N2 氣吹干，然后用1mL 流動相復溶；-復溶液用0.22μm 微孔濾器過濾后轉移至樣品瓶中用于HPLC或LC-MS 等儀器分析。

十一、操作流程圖示

產(chǎn)品信息：

  產(chǎn)品名稱：嘔吐毒素免疫親和柱

  產(chǎn)品貨號：LD-003

  產(chǎn)品描述：嘔吐毒素單克隆抗體

  包裝單位：25支/盒

  儲存條件：2～8℃，切勿冷凍

  保質期：18個月

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